生物化學(xué)實驗指導(dǎo)教程

第一篇基礎(chǔ)實驗/1
實驗一糖類的顏色反應(yīng)1
一、α-萘酚反應(yīng)（Molisch反應(yīng)）1
二、間苯二酚反應(yīng)（Seliwanoff反應(yīng)）3
實驗二糖類的還原作用5
實驗三蒽酮比色法測定總糖含量8
實驗四還原糖的測定——3,5-二硝基水楊酸比色法11
實驗五鄰甲苯胺法測定血糖14
糖類習(xí)題集16
實驗六脂肪的粗提和定量測定18
實驗七脂肪碘值的測定20
實驗八脂肪的組成23
實驗九卵磷脂的提取和鑒定26
實驗十血清膽固醇的定量測定（醋酸酐法）28
脂類習(xí)題集30
實驗十一蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗——蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)32
一、雙縮脲反應(yīng)32
二、茚三酮反應(yīng)34
三、黃色反應(yīng)36
四、考馬斯亮藍反應(yīng)38
實驗十二蛋白質(zhì)等電點的測定和蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)40
一、蛋白質(zhì)等電點的測定40
二、蛋白質(zhì)的沉淀與變性42
三、尿蛋白定性檢驗46
實驗十三酪蛋白的提取49
實驗十四考馬斯亮藍G-250法（Bradford法）測定蛋白質(zhì)的濃度51
實驗十五蛋白質(zhì)含量測定——微量凱氏定氮法54
實驗十六雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量59
實驗十七福林-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)61
實驗十八血清蛋白質(zhì)乙酸纖維素薄膜電泳63
實驗十九垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)67
實驗二十SDS-PAGE電泳測定蛋白質(zhì)分子量69
實驗二十一蛋白質(zhì)DNS分析法(DNS-Cl膜色譜技術(shù))73
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能習(xí)題集75
實驗二十二哺乳動物基因組DNA的提取78
實驗二十三植物基因組DNA的提取81
實驗二十四應(yīng)用PCR技術(shù)擴增DNA分子84
實驗二十五DNA的瓊脂糖凝膠電泳87
實驗二十六酵母RNA的分離與組分鑒定91
核酸的結(jié)構(gòu)與功能習(xí)題集93
實驗二十七酶的特性96
一、溫度對酶活力的影響96
二、pH對酶活力的影響98
三、唾液淀粉酶的活化和抑制100
四、酶的專一性102
實驗二十八肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活力的測定106
實驗二十九過氧化氫酶和過氧化物酶的作用109
實驗三十堿性磷酸酶的分離與純化112
酶類習(xí)題集114
實驗三十一維生素C的定量測定——2,4-二硝基苯肼法119
實驗三十二維生素A的定性測定123
實驗三十三維生素B1的定性測定125
實驗三十四胡蘿卜素的定量測定127
維生素習(xí)題集129

第二篇綜合實驗/131
實驗三十五小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較131
實驗三十六酵母蔗糖酶的提取、純化及效果分析135
實驗三十七脲酶的分離純化及酶學(xué)特性研究139
實驗三十八大腸埃希菌質(zhì)粒DNA的提取、酶切和瓊脂糖凝膠電泳鑒定154

附錄/159
一、實驗室基本操作159
（一）玻璃儀器的洗滌159
（二）一些常用的清洗液159
（三）溶液的混勻160
二、常用儀器的使用和注意事項161
（一）移液器161
（二）電子天平162
（三）離心機163
（四）酸度計164
（五）紫外分光光度計166
三、試劑的配制及其分級168
（一）試劑配制的注意事項168
（二）幾種常用緩沖液的配制169
（三）常用酸堿指示劑174
四、習(xí)題參考答案176