生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

目錄
前言
實(shí)驗(yàn)須知 1
實(shí)驗(yàn)基本操作 4
一、玻璃儀器的洗滌 4
二、吸量管的使用 5
三、定量吸（移）液器 5
四、容量瓶及量筒 6
五、離心機(jī)及其使用方法 6
六、溶液的混勻 6
七、保溫 7
八、過濾 7
九、加熱 7
實(shí)驗(yàn)一 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳 8
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點(diǎn)測定 12
實(shí)驗(yàn)三 血清蛋白質(zhì)的鹽析及白球比的測定 15
實(shí)驗(yàn)四 雙縮脲法測定血清蛋白質(zhì)的含量 20
實(shí)驗(yàn)五 凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量 23
實(shí)驗(yàn)六 RIPA法提取肝總蛋白質(zhì) 27
實(shí)驗(yàn)七 血清蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳 29
實(shí)驗(yàn)八 影響酶活性的因素 33
一、溫度對酶活性的影響 33
二、pH對酶活性的影響 34
三、激動劑和抑制劑對酶活性的影響 35
實(shí)驗(yàn)九 酶的競爭性抑制作用 37
實(shí)驗(yàn)十 維生素C的定量測定 39
實(shí)驗(yàn)十一 胰島素、腎上腺素對家兔血糖濃度的影響 43
實(shí)驗(yàn)十二 飽食和饑餓小白鼠肝糖原含量的比較 46
實(shí)驗(yàn)十三 葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度 48
實(shí)驗(yàn)十四 血清中甘油三酯的測定 51
一、方法一 52
二、方法二 53
實(shí)驗(yàn)十五 血清中總膽固醇的測定 55
實(shí)驗(yàn)十六 酮體的生成和利用 57
實(shí)驗(yàn)十七 過氧化脂質(zhì)的測定 61
實(shí)驗(yàn)十八 血清中肌酐濃度的測定（除蛋白堿性苦味酸法） 63
實(shí)驗(yàn)十九 核酸的定量測定（紫外吸收法） 65
實(shí)驗(yàn)二十 組織DNA的提取與鑒定 68
實(shí)驗(yàn)二十一 DNA和RNA濃度的檢測 71
實(shí)驗(yàn)二十二 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取與純化 73
實(shí)驗(yàn)二十三 肝總RNA的提取與瓊脂糖凝膠電泳鑒定 78
實(shí)驗(yàn)二十四 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測肝甘油醛-3-磷酸脫氫酶mRNA 81
實(shí)驗(yàn)二十五 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化及重組子的篩選 87
實(shí)驗(yàn)二十六 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá) 91
實(shí)驗(yàn)二十七 質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶消化及鑒定 94
實(shí)驗(yàn)二十八 質(zhì)粒DNA與外源DNA的連接 97
實(shí)驗(yàn)二十九 人血管生長因子基因（hVEGF）的PCR定點(diǎn)突變 99
實(shí)驗(yàn)三十 熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒核酸 103
生物化學(xué)與分子生物學(xué)常用儀器設(shè)備介紹 107
一、通風(fēng)櫥 107
二、恒溫?fù)u床 108
三、細(xì)菌培養(yǎng)箱 109
四、PCR儀 112
五、臺式高速離心機(jī) 113
六、比色分析法及721-B型分光光度計 115
七、微量移液器 117
八、數(shù)顯恒溫水浴鍋 119
九、超凈工作臺 120
十、高壓蒸汽滅菌鍋 121
十一、pH計 123
十二、渦旋儀 124
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)無菌操作原則 125
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)無菌操作技術(shù)及注意事項(xiàng) 126
一、玻璃器皿的消毒和清潔 126
二、無菌器材和液體的準(zhǔn)備 127
三、無菌操作過程 127
四、常用清潔液的配制方法 127
實(shí)驗(yàn)報告格式與內(nèi)容 128