醫(yī)學免疫學實驗

第 1章　抗體制備技術(shù) 1
實驗一　多克隆抗體的制備 .1
一、抗體制備的流程 .1
二、兔抗人全血清的多克隆抗體制備 .3
三、兔抗羊紅細胞的多克隆抗體制備 .5
實驗二　單克隆抗體的制備 .6
實驗三　抗體的純化與保存 .11
一、特異性抗體的純化 .11
二、 IgG的純化 .11
三、 IgM的純化 .15
四、 SDS-PAGE法檢測免疫球蛋白純度 .16
五、抗體的保存 .17
第 2章　抗原抗體反應 18
實驗四　凝集反應 .18
一、 ABO血型的鑒定（玻片法） .18
二、 SPA協(xié)同凝集試驗——顆粒性抗原的檢測 .20
三、間接凝集抑制試驗——妊娠檢驗 .22
四、間接血凝試驗 .22
五、反向間接血凝試驗 .24
實驗五　免疫沉淀反應 .25
一、雙向免疫擴散 .25
二、單向免疫擴散 .26
三、環(huán)狀沉淀試驗——血跡鑒定 28
四、瓊脂凝膠對流免疫電泳 29
五、火箭免疫電泳試驗 .30
六、免疫濁度測定 .32
實驗六　補體結(jié)合試驗 .33
實驗七　免疫印跡技術(shù) .35


VI　醫(yī)學免疫學實驗
第 3章　免疫標記技術(shù) 39
實驗八　酶免疫技術(shù) 39
一、酶聯(lián)免疫吸附試驗 .39
二、酶免疫組織化學技術(shù) 42
實驗九　熒光免疫技術(shù) .43
一、直接免疫熒光法——檢測 B細胞膜表面免疫球蛋白 .43
二、間接免疫熒光法——檢測痢疾桿菌 .44
實驗十　生物素 -親和素技術(shù) .46
第 4章　免疫細胞檢測技術(shù) 48
實驗十一　人外周血單個核細胞分離及觀察 .48
實驗十二　 T細胞功能檢測 49
一、 T淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗 49
二、 E花環(huán)形成試驗 51
三、流式細胞術(shù)檢測法 .52
四、 CTL介導的細胞毒試驗 .53
實驗十三　 B細胞功能檢測——溶血空斑試驗 55
實驗十四　固有免疫細胞功能檢測 .56
一、炎癥模型建立及細胞吞噬現(xiàn)象觀察 .56
二、 NK細胞介導的細胞毒試驗 .58
第 5章　細胞因子及其受體的檢測 60
實驗十五　白細胞介素 -1的檢測 60
實驗十六　白細胞介素 -2的檢測 62
實驗十七　白細胞介素 -2受體的檢測 63
一、可溶性白細胞介素 -2受體的檢測 .64
二、膜結(jié)合型白細胞介素 -2受體陽性細胞檢測 65
實驗十八　腫瘤壞死因子的檢測 .66
一、腫瘤壞死因子的含量檢測 66
二、腫瘤壞死因子的活性檢測 67
第 6章　 HLA分型技術(shù) . 69
實驗十九　補體介導的細胞毒試驗 .70
實驗二十　混合淋巴細胞培養(yǎng) .71
實驗二十一　 PCR-SSP檢測 HLA-B27 .72
實驗二十二　 HLA基因分型——限制性片段長度多態(tài)性法 73
第 7章　免疫 PCR技術(shù) 76
實驗二十三　免疫 PCR法檢測人腫瘤壞死因子 76


第 8章　超敏反應的檢測 79
實驗二十四　豚鼠過敏試驗 .79
實驗二十五　青霉素過敏試驗 .80
實驗二十六　血清 IgE測定 .81
一、血清總 IgE測定 .82
二、特異性 IgE測定 .83
實驗二十七　自身抗體檢測 .83
一、抗核抗體檢測 .84
二、抗胰島素抗體檢測 .85
實驗二十八　循環(huán)免疫復合物檢測 .86
一、 PEG沉淀法檢測循環(huán)免疫復合物 86
二、含甲狀腺球蛋白免疫復合物的測定 .87
實驗二十九　類風濕因子的檢測 .88
一、膠乳凝集試驗測定類風濕因子 88
二、 ELISA法測定類風濕因子 89
實驗三十　結(jié)核菌素試驗 .90
實驗三十一　植物血凝素皮膚試驗 .91
附錄 93
附錄 Ⅰ　試劑的濃度 .93
附錄 Ⅱ　常用免疫學檢驗正常值 .94
附錄 Ⅲ　常用實驗動物技術(shù) .96
附錄 Ⅳ　免疫學實驗常用儀器 .99
附錄 Ⅴ　免疫學常用試劑的配制 .103
附錄 Ⅵ　實驗室規(guī)則 .106
附錄Ⅶ　醫(yī)學免疫學實驗報告冊 .107

參考文獻 …122