現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)

前言
第1章 研究顯微鏡與顯微圖像分析技術(shù)
1.1 普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用
1.2 倒置相差顯微鏡的原理及使用
1.3 熒光顯微鏡的原理及使用
1.4 激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)
1.5 顯微操作技術(shù)
1.5.1 體細(xì)胞顯微注射技術(shù)
1.5.2 受精卵顯微注射技術(shù)
1.6 活細(xì)胞熒光顯微成像技術(shù)
1.7 細(xì)胞顯微圖像分析技術(shù)
第2章 電鏡技術(shù)
2.1 透射電鏡
2.2 TEM樣品制備技術(shù)
2.2.1 TEM超薄切片技術(shù)
2.2.2 TEM負(fù)染色技術(shù)
2.2.3 TEM細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
2.2.4 石蠟組織與石蠟切片的TEM樣品制備
2.3 掃描電子顯微鏡
2.4 SEM樣品制備
2.4.1 常規(guī)SEM生物樣品制備
2.4.2 SEM游離細(xì)胞制備
2.4.3 SEM免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
第3章 細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
3.1 普通細(xì)胞化學(xué)
3.1.1 細(xì)胞化學(xué)理論知識(shí)
3.1.2 PAS（periodic acid Sehiff reaction）法顯示糖原
3.1.3 蘇丹Ⅲ染色法顯示脂類
3.1.4 酸性蛋白與堿性蛋白的顯示
3.1.5 細(xì)胞骨架微絲蛋白的顯示
3.1.6 Feulgen法顯示核酸
3.1.7 甲基綠-派洛嚀法顯示核酸
3.1.8 Giemsa染色法顯示染色質(zhì)/體
3.1.9 蘇木精-伊紅染色顯示細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)
3.2 酶細(xì)胞化學(xué)
3.2.1 酶細(xì)胞化學(xué)的基本理論
3.2.2 堿性磷酸酶顯示
3.2.3 金屬沉淀法顯示酸性磷酸酶
3.2.4 聯(lián)苯胺法顯示過(guò)氧化物酶
3.2.5 通過(guò)琥珀酸脫氫酶活性進(jìn)行MTT法檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)存活率
3.3 免疫細(xì)胞化學(xué)
用ABC方法來(lái)鑒定體外培養(yǎng)的小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
3.4 熒光細(xì)胞化學(xué)與免疫熒光細(xì)胞化學(xué)
3.4.1 吖啶橙熒光染色法
3.4.2 間接免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法顯示細(xì)胞中的微管蛋白
3.4.3 用雙重免疫熒光標(biāo)記法鑒定體外培養(yǎng)的小鼠神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞
3.4.4 用雙重免疫熒光法鑒定組織切片中的兩種細(xì)胞的方法
第4章 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
4.1 細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù)
4.1.1 細(xì)胞在體外生長(zhǎng)的條件
4.1.2 培養(yǎng)細(xì)胞常用設(shè)備和用品
4.1.3 培養(yǎng)用品的清洗
4.1.4 培養(yǎng)用品的滅菌與消毒
4.1.5 無(wú)菌操作的基本要領(lǐng)和要求
4.1.6 細(xì)胞培養(yǎng)用液
4.2 細(xì)胞培養(yǎng)的方法
4.2.1 原代細(xì)胞培養(yǎng)
4.2.2 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
4.3 體外培養(yǎng)細(xì)胞的觀察方法
4.3.1 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特征與形態(tài)分型
4.3.2 培養(yǎng)細(xì)胞固定、染色觀察的一般標(biāo)本制備
4.3.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
4.3.4 細(xì)胞的顯微測(cè)量
4.4 培養(yǎng)細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運(yùn)輸
4.5 培養(yǎng)細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)方法
4.5.1 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
4.5.2 分裂指數(shù)測(cè)定
4.5.3 克?。洌┬纬稍囼?yàn)
4.5.4 BrdU摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖指數(shù)
4.6 腫瘤細(xì)胞黏附和侵襲能力的體外檢測(cè)方法
4.6.1 腫瘤細(xì)胞的黏附能力分析實(shí)驗(yàn)
4.6.2 細(xì)胞侵襲重建基底膜實(shí)驗(yàn)
4.6.3 腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
4.7 哺乳動(dòng)物正常組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)與應(yīng)用
4.7.1 胎鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法
4.7.2 含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的藥理實(shí)驗(yàn)
4.7.3 四氯化碳致肝細(xì)胞損傷及SOD活性檢測(cè)
第5章 培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)
5.1 光學(xué)顯微鏡形態(tài)學(xué)檢測(cè)
5.1.1 臺(tái)盼藍(lán)染色法顯示凋亡細(xì)胞
5.1.2 蘇木精-伊紅染色（HE染色）顯示凋亡細(xì)胞
5.1.3 Giemsa染色法顯示凋亡細(xì)胞
5.1.4 吖啶橙熒光染色顯示凋亡細(xì)胞
5.1.5 Ho.33342與PI熒光雙染顯示凋亡與壞死細(xì)胞
5.2 凋亡細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察
5.2.1 透射電鏡觀察凋亡細(xì)胞
5.2.2 掃描電鏡觀察凋亡細(xì)胞
5.3 凋亡細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性檢測(cè)（MTT法）
5.4 DNA電泳檢測(cè)凋亡梯狀帶
5.5 細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸熒光顯示
5.6 凋亡細(xì)胞原位末端標(biāo)記
第6章 細(xì)胞工程
6.1 細(xì)胞融合
6.1.1 聚乙二醇介導(dǎo)的細(xì)胞融合
6.1.2 細(xì)胞電融合
6.1.3 早熟染色體凝集的誘導(dǎo)和觀察
6.2 細(xì)胞的分離
6.2.1 淋巴細(xì)胞的分離純化
6.2.2 死活細(xì)胞的分離
6.3 細(xì)胞器的分離
第7章 原位雜交技術(shù)
7.1 地高辛標(biāo)記的原位雜交
7.2 放射性同位素標(biāo)記的原位雜交
7.3 胚胎整體原位雜交
第8章 細(xì)胞化學(xué)成分的分離與測(cè)定
8.1 蛋白質(zhì)SDS-PAGE凝膠電泳
8.2 真核細(xì)胞基因組DNA的提取
8.3 真核細(xì)胞RNA的提取
8.4 免疫沉淀法分離并定量分析目的蛋白質(zhì)
8.5 蛋白質(zhì)免疫印跡法
8.6 蛋白質(zhì)雙向電泳分析細(xì)胞和組織中的蛋白質(zhì)群
第9章 真核細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染與表達(dá)技術(shù)
9.1 DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.1.1 磷酸鈣轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.1.2 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.2 基因在細(xì)胞中表達(dá)的檢測(cè)技術(shù)
9.2.1 DNA印跡雜交法
9.2.2 RNA印跡雜交法
9.2.3 蛋白印跡雜交法
9.2.4 綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染及檢測(cè)
第10章 哺乳動(dòng)物基因敲除技術(shù)
10.1 常用基因打靶載體的設(shè)計(jì)原則
10.1.1 P21（wAFl）基因打靶載體的構(gòu)建
10.1.2 C-Crk基因打靶載體的構(gòu)建
10.1.3 視黃醇脫氫酶RDH15基因打靶載體的構(gòu)建
10.2 胚胎干細(xì)胞基因敲除
10.2.1 胚胎干細(xì)胞的增殖和維持
10.2.2 胚胎干細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)電穿孔
10.2.3 鑒定、篩選重組的胚胎干細(xì)胞
10.3 嵌合體小鼠的制備
10.3.1 嵌合體小鼠的產(chǎn)生
10.3.2 GPI同工酶的水平淀粉凝膠電泳檢測(cè)嵌合體小鼠
10.4 基因敲除小鼠的建立
10.4.1 提取鼠尾DNA用PCR來(lái)檢測(cè)敲除基因
第11章 干細(xì)胞和組織工程技術(shù)
11.1 胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與方法
11.1.1 小鼠胚胎干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
11.1.2 人胚胎干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
11.1.3 人類胚胎干細(xì)胞定向分化成神經(jīng)細(xì)胞
11.2 成體干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與方法
11.2.1 成人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)、純化及鑒定
11.2.2 人造血干/祖細(xì)胞的體外培養(yǎng)與檢測(cè)技術(shù)
11.2.3 大鼠胚胎腦神經(jīng)干細(xì)胞和祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)
11.3 神經(jīng)組織工程
第12章 流式細(xì)胞術(shù)
12.1 流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)、工作原理及應(yīng)用
12.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜受體（直標(biāo)法）
12.3 流式細(xì)胞儀同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外抗原
12.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡（PI單染色法）
12.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和壞死（PI和Annexin V-FITC雙染色法）
12.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度變化
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