生物化學技術(shù)實驗指導

第一部分　生物化學技術(shù)原理
　一、實驗記錄與實驗報告的書寫
　二、實驗室基本操作
　?。ㄒ唬┎Ａx器的洗滌與清潔
　?。ǘ┧芰掀髅蟮那逑?br />　?。ㄈ┣逑匆旱脑砼c配制
　?。ㄋ模┝科黝惖氖褂梅?br />　?。ㄎ澹┻^濾方法
　　（六）試管及離心管中液體的混勻操作
　三、幾種常規(guī)儀器的使用
　?。ㄒ唬┓止夤舛扔?br />　?。ǘ╇娮犹炱?br />　?。ㄈ└稍锵浜秃銣叵?br />　?。ㄋ模╇姛岷銣厮?br />　　（五）離心機
　四、生物大分子的制備及鑒定
　　（一）鹽析技術(shù)
　?。ǘ┩肝龊统瑸V
　?。ㄈp壓濃縮和冷凍干燥
　五、層析技術(shù)
　　（一）吸附層析
　?。ǘ┓峙鋵游?br />　　（三）離子交換層析
　?。ㄋ模┠z過濾層析
　　（五）親和層析
　六、電泳技術(shù)
　?。ㄒ唬┗驹?br />　?。ǘ┯绊懹緞勇实囊蛩?br />　?。ㄈ╇娪炯夹g(shù)的種類
第二部分　生物化學實驗
　第一節(jié)　基本實驗
　　實驗一　苯酚－硫酸法測定水溶性多糖
　　實驗二　氨基酸紙上層析
　　實驗三　糖的硅膠G薄層層析
　　實驗四　磷脂的分離與鑒定——薄層層析法
　　實驗五　甲醛滴定法定量測定氨基酸
　　實驗六　蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點的測定
　　實驗七　蛋白質(zhì)濃度的測定
　　實驗八　微量凱氏定氮法沒總蛋白氮
　　實驗九　核酸的定量測定
　　實驗十　維生素C的定量測定——2，6－二氯酚靛酚滴定法
　第二節(jié)　綜合性實驗
　　實驗一　蔗糖酶的提取及初提純
　　實驗二　蔗糖酶的純化——Q Sepharose－柱層析法
　　實驗三　蔗糖酶活力的測定
　　實驗四　蔗糖酶蛋白質(zhì)含量測定及比活力計算
　　實驗五　SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量
　　實驗六　蔗糖酶的固定化及活力測定
　第三節(jié)　選擇性實驗
　　實驗一　底物濃度對酶促進反應(yīng)速度的影響——米氏常數(shù)的測定
　　實驗二　酶的特異性、溫度、pH及激活劑對酶活性的影響
　　實驗三　大豆總異黃酮的提取及含量測定
　　實驗四　類胡蘿卜互的色層分析及鑒定
　　實驗五　組織DNA的提取及定量測定
　　實驗六　DNA瓊脂糖凝膠電泳
　　實驗七　紙電泳法定量分析腺苷三磷酸
　　實驗八　葡聚糖凝膠層析法測定蛋白質(zhì)的分子量
　　實驗九　酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）測定乳汁中孕酮含量
　　實驗十　血清蛋白質(zhì)的層析分離——血清γ－球蛋白的分離純化（他子篩層析法）
　　實驗十一　血清蛋白質(zhì)的電泳分離——醋酸纖維素薄膜電泳　
　　實驗十二　脲酶的凝膠過濾分離純化
　　實驗十三　血清蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳
　　實驗十四　肝糖原的提取和定量
　　實驗十五　蛋白質(zhì)印跡分析
　　實驗十六　單向定量免疫電泳
附錄
　一、生物化學實驗室規(guī)則　
　二、實驗室安全及防護知識
　三、常用數(shù)據(jù)表
參考文獻