醫(yī)學生物學實驗教程

第一章  緒論
　第一節(jié) 實驗教學的目的和要求
　第二節(jié) 實驗報告的撰寫
　第三節(jié) 實驗室守則
第二章  醫(yī)學生物學實驗基本技術(shù)及原理
　第一節(jié) 生物化學與分子生物學實驗常用儀器與基本操作
　　一、常用儀器設(shè)備
　　二、基本操作
　　三、實驗樣品的制備
　第二節(jié) 生物化學常用實驗方法及基本原理
　　一、分光光度法
　　二、層析法
　　三、電泳法
　　四、離心分離技術(shù)
　第三節(jié) 分子生物學常用實驗方法及基本原理
　　一、PCR技術(shù)
　　二、印跡技術(shù)
　　三、核酸分子雜交技術(shù)
　　四、重組DNA技術(shù)
　第四節(jié) 細胞生物學與遺傳學實驗常用儀器和基本操作
　　一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用
　　二、細胞培養(yǎng)必需設(shè)備和無菌操作技術(shù)
　第五節(jié) 細胞生物學常用實驗方法及基本原理
　　一、細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法
　　二、細胞組分的分析方法
　　三、流式細胞分析技術(shù)
　　四、細胞培養(yǎng)技術(shù)
　第六節(jié) 醫(yī)學遺傳學常用實驗方法及基本原理
　　一、染色體的制備與分析技術(shù)
　　二、人類遺傳病的分子生物學診斷方法
第三章  細胞和亞細胞組分分析實驗方法
　第一節(jié) 細胞培養(yǎng)的基本方法
　　一、細胞的原代培養(yǎng)
　　實驗1 雞胚成纖維細胞的原代細胞培養(yǎng)
　　實驗2 大鼠骨髓基質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)
　　二、細胞的傳代培養(yǎng)
　　實驗1 貼壁細胞的傳代培養(yǎng)
　　實驗2 懸浮細胞的傳代培養(yǎng)
　　三、培養(yǎng)細胞的生長測定
　　實驗1 體外培養(yǎng)細胞的計數(shù)與死、活細胞鑒別
　　實驗2 MTT比色法
　　實驗3 化學物質(zhì)對細胞的作用
　第二節(jié) 細胞和亞細胞組分分析的生物學實驗方法
　　一、細胞形態(tài)和細胞分裂的觀察
　　實驗1 細胞標本的制備與形態(tài)觀察
　　實驗2 細胞無絲分裂和有絲分裂
　　二、亞細胞組分的分離及觀察鑒定方法
　　實驗 亞細胞組分的分離及觀察鑒定
第四章  生物分子分析實驗方法
　第一節(jié) 生物分子在細胞內(nèi)定位與分布的分析方法
　　一、核酸在細胞內(nèi)的分布
　　實驗 DNA特異顯示法定性分析核酸在細胞內(nèi)的分布
　　二、酶和蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的定位
　　實驗1 乳酸脫氫酶在細胞內(nèi)定位的分析
　　實驗2 堿性和酸性蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)定位的分析
　　三、糖和脂類在細胞內(nèi)的分布
　　實驗1 過碘酸希夫反應(yīng)定性分析糖原在細胞內(nèi)的分布
　　實驗2 蘇丹黑染色法定性分析脂類在細胞內(nèi)的分布
　第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分析實驗方法
　　一、蛋白質(zhì)性質(zhì)的分析
　　實驗1 蛋白質(zhì)的兩性解離性和等電點測定
　　實驗2 蛋白質(zhì)的變性和沉淀反應(yīng)
　　二、蛋白質(zhì)含量的測定
　　實驗1 蛋白質(zhì)含量的Folin-酚法測定
　　實驗2 紫外光吸收法測定蛋白質(zhì)濃度
　　三、蛋白質(zhì)和氨基酸的分離、提取、純化和鑒定
　　實驗1 離子交換柱層析法分離混合氨基酸
　　實驗2 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
　　實驗3 血清r-球蛋白的初步分離提取
　　實驗4 血清r-球蛋白的精細分離與純度鑒定
　第三節(jié) 酶的分析實驗方法
　　一、酶反應(yīng)條件的選擇
　　實驗酶促反應(yīng)的影響因素
　　二、酶促反應(yīng)動力學研究
　　實驗堿性磷酸酶的Km值測定
　　三、酶的分離提取及活性測定
　　實驗堿性磷酸酶的分離提取和比活性測定
　第四節(jié) 糖類和脂類分析實驗方法
　　一、糖類分離、提取和鑒定
　　實驗茯苓多糖和豬苓多糖的水解與鑒定
　　二、脂類分離、提取和鑒定
　　實驗脂質(zhì)的薄層層析
第五章  分子生物學實驗方法
　第一節(jié) DNA的制備與分析方法
　　一、DNA的制備
　　實驗1 組織DNA的分離、提取和純化
　　實驗2 血細胞DNA的快速分離提取
　　二、DNA的分析
　　實驗1 瓊脂糖凝膠電泳法分離DNA片段
　　實驗2 核酸分子探針標記與雜交實驗
　第二節(jié) 基因表達分析方法
　　一、RNA的制備
　　實驗動物組織總RNA的提取和純化
　　二、基因表達的分析方法
　　實驗1 RT—PCR法檢測基因的表達
　　實驗2 蛋白質(zhì)印跡法
　第三節(jié) 基因工程技術(shù)
　　一、載體DNA的制備與鑒定
　　實驗質(zhì)粒DNA的快速分離提取和酶切與鑒定
　　二、體外DNA擴增技術(shù)
　　實驗聚合酶鏈式反應(yīng)擴增基因組DNA
　　三、目的基因的分離與鑒定
　　實驗小鼠肝臟細胞β-actin基因片段的分離提取、擴增與鑒定
　　四、重組DNA分子的構(gòu)建、導(dǎo)入和篩選
　　實驗1 目的基因的純化與回收和重組DNA的構(gòu)建
　　實驗2 重組DNA的導(dǎo)入和篩選
第六章  生物學實驗技術(shù)在醫(yī)學研究中的應(yīng)用
　第一節(jié) 臨床疾病與生物化學特定物質(zhì)的測定
　　一、高脂血癥與血清脂類分析測定
　　實驗血清甘油三酯、總膽固醇和HDL一膽固醇的測定
　　二、糖尿病與血糖濃度分析測定
　　實驗血糖濃度的定量測定
　　三、肝臟疾病與血清酶活性的分析測定
　　實驗血清谷一丙轉(zhuǎn)氨酶活性測定
　　四、腎功能異常與血清尿素氮的分析測定
　　實驗血清尿素氮含量的測定
　第二節(jié) 人類遺傳疾病與染色體核型和系譜分析
　　一、染色體的制備與觀察
　　實驗1 小鼠骨髓細胞染色體標本的制備與觀察
　　實驗2 人體外周淋巴細胞培養(yǎng)及染色體標本的制備
　　實驗3 人類染色體顯帶技術(shù)
　　二、染色體的核型分析
　　實驗正常人染色體核型分析及人類異常染色體的識別
　　三、系譜的繪制和分析
　　實驗系譜分析
　　四、人類遺傳病的分型及特點
　　實驗 人類遺傳病的分型及特點
　第三節(jié) 生物學實驗技術(shù)在腫瘤研究中的應(yīng)用
　　一、腫瘤細胞的集落培養(yǎng)與細胞中物質(zhì)的測定
　　實驗?zāi)[瘤細胞集落形成率和細胞中總蛋白質(zhì)含量的測定
　　二、分子生物學實驗技術(shù)在癌癥研究中的應(yīng)用
　　實驗PCR—SSCP技術(shù)在癌基因篩查中的應(yīng)用
參考文獻
附錄