生物技術(shù)原理與實驗

上篇生物技術(shù)原理
第一章基因工程技術(shù)
第一節(jié)克隆載體
第二節(jié)重組DNA技術(shù)
第三節(jié)基因文庫的構(gòu)建
第四節(jié)PCR技術(shù)
第五節(jié)核酸分子雜交技術(shù)
第六節(jié)DNA測序技術(shù)
第七節(jié)轉(zhuǎn)基因技術(shù)
第二章蛋白質(zhì)及酶工程技術(shù)
第一節(jié)蛋白質(zhì)的提取與粗分級
第二節(jié)蛋白質(zhì)的細(xì)分級
第三節(jié)蛋白質(zhì)的鑒定
第四節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測定
第五節(jié)定點突變技術(shù)
第六節(jié)蛋白質(zhì)的原核和真核表達(dá)技術(shù)
第七節(jié)酶工程（酶蛋白工程）概述
第三章細(xì)胞工程技術(shù)
第一節(jié)植物細(xì)胞工程技術(shù)
第二節(jié)動物細(xì)胞工程技術(shù)
第四章發(fā)酵工程技術(shù)
第一節(jié)微生物發(fā)酵方式
第二節(jié)發(fā)酵過程
第五章其他常用技術(shù)
第一節(jié)功能基因的克隆技術(shù)
第二節(jié)基因表達(dá)分析技術(shù)
第三節(jié)RNA干擾（RNAi）技術(shù)
第四節(jié)雙向電泳技術(shù)
第五節(jié)毛細(xì)管電泳技術(shù)
第六節(jié)酵母雙雜交技術(shù)
下篇基本實驗
第六章基因工程實驗
實驗一堿裂解法提取質(zhì)粒DNA
實驗二DNA酶切及瓊脂糖凝膠電泳
實驗三大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備和質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化
實驗四.PCR擴(kuò)增DNA特異性片段
實驗五真核生物基因組DNA的提取
實驗六植物組織總RNA的提取及變性電泳
實驗七Northern雜交
實驗八基因組文庫的構(gòu)建
實驗九cDNA文庫的構(gòu)建
實驗十動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)--動物細(xì)胞的磷酸鈣沉淀轉(zhuǎn)化法
實驗十一植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)--農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花芽浸泡法轉(zhuǎn)化擬南芥植株
實驗十二植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)--農(nóng)桿菌介導(dǎo)的雙子葉植物葉盤轉(zhuǎn)化法
第七章蛋白質(zhì)及酶工程實驗
實驗一生物組織總蛋白質(zhì)的提取
實驗二考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)含量
實驗三變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）測定蛋白質(zhì)亞基分子量
實驗四大腸桿菌中重組蛋白質(zhì)的誘導(dǎo)表達(dá)與親和層析純化
實驗五蛋白質(zhì)的免疫印跡分析
實驗六Edman降解法測定小肽的氨基酸序列
實驗七蛋白質(zhì)結(jié)晶
實驗八酶的基本特性
實驗九綠色熒光蛋白（GFP）定點突變
第八章細(xì)胞工程實驗
實驗一MS培養(yǎng)基母液的配制
實驗二培養(yǎng)基的配制與滅菌
實驗三植物培養(yǎng)材料的滅菌與接種
實驗四種胚的離體培養(yǎng)
實驗五愈傷組織的誘導(dǎo)
實驗六懸浮細(xì)胞系的建立
實驗七植物原生質(zhì)體的游離和融合
實驗八草莓遺傳轉(zhuǎn)化實驗（農(nóng)桿菌介導(dǎo)法）
實驗九水稻懸浮細(xì)胞的遺傳轉(zhuǎn)化實驗（基因槍法）
實驗十動物組織的消化培養(yǎng)及單細(xì)胞的獲得
第九章發(fā)酵工程實驗
實驗一凝固型酸奶的制作
實驗二纖維素酶生產(chǎn)（一）--固體發(fā)酵法生產(chǎn)纖維素酶
實驗三纖維素酶生產(chǎn)（二）--分級鹽析法純化纖維素酶
實驗四纖維素酶生產(chǎn)（三）--凝膠過濾層析法純化纖維素酶
實驗五四環(huán)素發(fā)酵代謝曲線的繪制
第十章綜合設(shè)計實驗
實驗一溶菌酶的純化、結(jié)晶與酶活測定
實驗二種子蛋白質(zhì)含量及組成分析
實驗三植物蛋白酶的分離純化與鑒定
實驗四綠色熒光蛋白的原核表達(dá)、純化及鑒定
實驗五轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因煙草的獲得及鑒定
實驗六大腸桿菌堿性磷酸酶定點誘變與酶活分析
附錄
附錄一實驗室規(guī)則
附錄二實驗室安全及防護(hù)
附錄三常用儀器的使用
附錄四常用因特網(wǎng)網(wǎng)址
附錄五常用緩沖溶液及試劑的配制
附錄六常用實驗數(shù)據(jù)